Taxonomía de los hongos: un rompecabezas al que le faltan muchas piezas

Los hongos son organismos polifacéticos presentes en casi todos los ecosistemas de la tierra, donde establecen diversos tipos de simbiosis con otros seres vivos. A pesar de ser reconocidos por los humanos desde la antigüedad -y de la cantidad de trabajos que han profundizado sobre su biología y ecología-, aún falta mucho por conocer sobre estos organismos. Algunos de los criterios que clásicamente se han utilizado para su estudio, hoy resultan limitados y hasta cierto punto permiten un agrupamiento de los aislamientos según algunas características, pero generan confusión en su clasificación y, más aún, cuando se pretende comprender sus relaciones genealógicas. Los caracteres fenotípicos no son suficientes para identificar una especie de hongos y, menos aún, para construir una filogenia amplia o de un grupo particular. Hay grandes vacíos que hacen que los árboles generados sean inestables y fácilmente debatidos. Para los profesionales de la salud, parece que la identificación de los hongos hasta niveles inferiores como género y especie es suficiente para elegir el tratamiento más adecuado para su control, comprender la epidemiología de los cuadros clínicos asociados y reconocer los brotes y los factores determinantes de la resistencia a los antimicrobianos. No obstante, la ubicación taxonómica dentro del reino permitiría establecer relaciones filogenéticas entre los taxones fúngicos, facilitando la comprensión de su biología, su distribución en la naturaleza y la evolución de su potencial patogénico. Los avances de las técnicas de biología molecular y las ciencias de la computación en los últimos 30 años han permitido cambios importantes dirigidos a establecer los criterios para definir una especie fúngica y alcanzar una construcción filogenética más o menos estable. Sin embargo, el camino por recorrer aún es largo, y supone un trabajo mancomunado de la comunidad científica a nivel global y el apoyo a la investigación básica.

Fungi are multifaceted organisms found in almost all ecosystems on Earth, where they establish various types of symbiosis with other living beings. Despite being recognized by humans since ancient times, and the high number of works delving into their biology and ecology, much is still unknown about these organisms. Some criteria classically used for their study are nowadays limited, generating confusion in categorizing them, and even more, when trying to understand their genealogical relationships. To identify species within Fungi, phenotypic characters to date are not sufficient, and to construct a broad phylogeny or a phylogeny of a particular group, there are still gaps affecting the generated trees, making them unstable and easily debated. For health professionals, fungal identification at lower levels such as genus and species, is enough to select the most appropriate therapy for their control, understand the epidemiology of clinical pictures associated, and recognize outbreaks and antimicrobial resistance. However, the taxonomic location within the kingdom, information with apparently little relevance, can allow phylogenetic relationships to be established between fungal taxa, facilitating the understanding of their biology, distribution in nature, and pathogenic potential evolution. Advances in molecular biology and computer science techniques from the last 30 years have led to crucial changes aiming to establish the criteria to define a fungal species, allowing us to reach a kind of stable phylogenetic construction. However, there is still a long way to go, and it requires the joint work of the scientific community at a global level and support for basic research.

Genomic constellations of RVA detected in Brazil from 1986 to 2016: a temporal and geographical distribution and occurrence of reassortments / Constelações genômicas de RVA detectadas no Brasil de 1986 a 2016: uma distribuição temporal e geográfica e ocorrência de rearranjos

INTRODUCTION: Species A rotavirus (RVA) infections are a major cause of severe gastroenteritis in children of <5 years worldwide. In Brazil, before vaccination, RVA was associated with 3.5 million episodes of acute diarrheal disease per year. Due to the segmented nature of their genomes, rotaviruses can exchange genes during co-infections, and generate new virus strains and new reinfections. OBJECTIVE: To evaluate the genomic diversity of RVA isolated in Brazil in 30 years, between 1986 to 2016, to investigate possible changes in the frequency of genotype constellations before and after the implementation of the vaccine. METHODS: In total, 4,474 nucleotide sequences were obtained from the Virus Variation Database. Genomic constellation was compared, and the proportion of rotavirus genotypes was analyzed by time and geographic region. RESULTS: Our results showed that major known genotypes were circulating in the country during the period under analysis, with a prevalence of the G1P[8] Wa-like genotype, decreasing only in the period immediately after the introduction of the vaccine. Regarding the geographical distribution, most of our constellations, 62 (39.2%), and 50 (31.6%) were concentrated in the North and Northeast regions. Our analysis also showed the circulation of multiple strains during the periods when the DS-1-like and AU-1-like genotypes were co-circulating with the Wa-like genotype. CONCLUSION: Therefore, it is likely that inter-genogroup reassortments are still occurring in Brazil and so it is important to establish an efficient surveillance system to follow the emergence of novel reassorted strains that might not be targeted by the vaccine.

INTRODUÇÃO: As infecções por rotavírus A (RVA) são uma das principais causas de gastroenterite grave em crianças <5 anos em todo o mundo. No Brasil, antes da vacinação, o RVA estava associado a 3,5 milhões de episódios de diarreia aguda por ano. Devido à natureza segmentada de seus genomas, os rotavírus podem trocar genes durante as coinfecções, gerar novas cepas de vírus e novas reinfecções. OBJETIVO: Avaliar a diversidade genômica de RVA isolados no Brasil entre 1986 a 2016 para investigar possíveis alterações na frequência das constelações de genótipos antes e após a implantação da vacina. MÉTODOS: No total, 4.474 sequências de nucleotídeos foram obtidas do Banco de Dados de Variação de Vírus. A constelação genômica foi comparada e a proporção dos genótipos de rotavírus foi analisada por tempo e região geográfica. RESULTADOS: Nossos resultados mostraram que os principais genótipos conhecidos circulavam no país no período em análise, com prevalência do genótipo G1P[8] Wa-like, diminuindo apenas no período imediatamente após a introdução da vacina. Em relação à distribuição geográfica, a maioria das nossas constelações, 62 (39,2%) e 50 (31,6%), concentrava-se nas regiões Norte e Nordeste. Nossa análise também mostrou a circulação de cepas múltiplas durante os períodos em que os genótipos DS-1-like e AU-1-like estavam co-circulando com o genótipo Wa-like. CONCLUSÃO: Portanto, é provável que rearranjos inter-genogrupos ainda estejam ocorrendo no Brasil e por isso é importante estabelecer um sistema de vigilância eficiente para acompanhar o surgimento de novas cepas rearranjadas que podem não ser protegidas pela vacina.

The molecular investigations on the subgenus Artemisia Less. of the genus Artemisia L. (Asteraceae) in Turkey / Investigações moleculares sobre o subgênero Artemisia Less. do gênero Artemisia L. (Asteraceae) na Turquia

Abstract The genus Artemisia L. of the family Asteraceae is systematically very complex. The aim of this study was to evaluate taxonomic positions of taxa of the subgenus Artemisia belonging to the genus Artemisia in Turkey using some molecular techniques. In this molecular study, 44 individuals belong to 14 species of the subgenus Artemisia were examined. Analyses were performed on the combined dataset using maximum parsimony, maximum likelihood and Bayesian inference and Molecular parameters obtained from co-evaluations of sequences of the psbA-trnH, ITS and ETS regions of examined individuals were used in the phylogenetic tree drawing. According to the results of this study, two molecular groups have been formed based on the DNA sequence similarity of the species, but there are no obvious morphological characters corresponding to two molecular groups. There is no also agreement between the two molecular groups and the two morphological groups formed according to the hairiness condition of the receptacle of species. Due to the lack of molecular significance of their receptacles with or without hair, dividing of the subgenus Artemisia species into new subgenera or sections was not considered appropriate. Likewise, it has been found that with or without hair on the corolla lobes of the central hermaphrodite disc flowers have no molecular significance. It was found that there were no gene flow and hybridization between the 14 species of the subgenus Artemisia and these 14 species were found completed their speciation. This study is important as it is the first molecular based study relating with belong to subgenus Artemisia species growing naturally in Turkey. In addition, new haplotypes related to the populations of Turkey belonging to the subgenus Artemisia taxa were reported by us for the first time and added to the GenBank database.

Resumo O gênero Artemisia L. da família Asteraceae é sistematicamente muito complexo. O objetivo deste estudo foi avaliar as posições taxonômicas de táxons do subgênero Artemisia pertencentes ao gênero Artemisia na Turquia usando algumas técnicas moleculares. Neste estudo molecular, 44 indivíduos pertencentes a 14 espécies do subgênero Artemisia foram examinados. As análises foram realizadas no conjunto de dados combinado usando máxima parcimônia, máxima verossimilhança e inferência bayesiana e parâmetros moleculares obtidos a partir de coavaliações de sequências das regiões psbA-trnH, ITS e ETS de indivíduos examinados foram usados ​​no desenho da árvore filogenética. De acordo com os resultados deste estudo, dois grupos moleculares foram formados com base na similaridade da sequência de DNA das espécies, mas não há caracteres morfológicos óbvios correspondentes a dois grupos moleculares. Também não há concordância entre os dois grupos moleculares e os dois grupos morfológicos formados de acordo com a condição de pilosidade do receptáculo da espécie. Devido à falta de significado molecular de seus receptáculos com ou sem cabelo, a divisão das espécies do subgênero Artemisia em novos subgêneros ou seções não foi considerada apropriada. Da mesma forma, verificou-se que com ou sem cabelo nos lobos da corola das flores do disco hermafrodita central não tem significado molecular. Constatou-se que não houve fluxo gênico e hibridização entre as 14 espécies do subgênero Artemisia e essas 14 espécies concluíram sua especiação. Este estudo é importante porque é o primeiro estudo de base molecular relacionado com espécies pertencentes ao subgênero Artemisia crescendo naturalmente na Turquia. Além disso, novos haplótipos relacionados às populações da Turquia pertencentes ao subgênero Artemisia taxa foram relatados por nós pela primeira vez e adicionados ao banco de dados do GenBank.

A new cryptic species of terrestrial breeding frog of the Pristimantisdanae Group (Anura, Strabomantidae) from montane forests in Ayacucho, Peru.

Based on morphological and molecular characters, we describe a new species of terrestrial breeding frog of the Pristimantisdanae Group from montane forests of La Mar Province, Ayacucho Department in southern Peru, at elevations from 1200 to 2000 m a.s.l. The phylogenetic analysis, based on concatenated sequences of gene fragments of 16S rRNA, RAG1, COI and TYR suggests that the new species is a sister taxon of a clade that includes one undescribed species of Pristimantis from Cusco, Pristimantispharangobates and Pristimantisrhabdolaemus. The new species is most similar to P.rhabdolaemus, which differs by lacking scapular tubercules and by its smaller size (17.0-18.6 mm in males [n = 5], 20.8-25.2 mm in females [n = 5] in the new species vs. 22.8-26.3 mm in males [n = 19], 26.0-31.9 mm in females [n = 30] of P.rhabdolaemus). Additionally, we report the prevalence of Batrachochytriumdendrobatidis (Bd) in this species.

ResumenDescribimos una nueva especie de rana terrestre de desarrollo directo del grupo Pristimantisdanae de bosques montanos procedentes de la provincia de La Mar, departamento de Ayacucho al sur de Perú con rango de distribución altitudinal entre los 1200­2000 msnm, en base a caracteres morfológicos y moleculares. El análisis filogenético basado en las secuencias concatenadas de los fragmentos de genes ARNr 16S, COI, RAG1 y TYR sugiere que la nueva especie es un taxón hermano del clado que incluye a una especie de Pristimantis no descrita de Cusco, Pristimantispharangobates y Pristimantisrhabdolaemus. La nueva especie se asemeja más a P.rhabdolaemus; de la cual difiere por la ausencia de tubérculos escapulares y su menor tamaño corporal (17.0­18.6 mm en machos [n=5], 20.8­25.2 mm en hembras [n=5] en la nueva especie vs 22.8­26.3 mm en machos [n=19], 26.0­31.9 mm en hembras [n=30] de P.rhabdolaemus). Adicionalmente, reportamos la prevalencia de Batrachochytriumdendrobatidis (Bd) en esta especie de Terrarana.

Caracterização da diversidade genética do gênero Boa (Serpentes: Boidae): implicações para conservação

A família Boidae (Squamata: Serpentes) é composta, atualmente, por cinco gêneros: Boa, Epicrates, Eunectes, Chilabothrus e Corallus. O gênero Boa, especificamente, é considerado monotípico (Boa constrictor), porém sua taxonomia, proposta com base na variação da coloração e padrões de manchas aliados a dados merísticos e morfométricos, é bastante controversa, fato que também leva ao questionamento de várias subespécies reconhecidas. Espécies crípticas ocorrem comumente na natureza e, para investigar a diversidade oculta em Boa, foram realizadas inferências filogenéticas empregando métodos de Máxima Verossimilhança e Inferência Bayesiana, a partir do DNA extraído de amostras de tecidos (fígado, muda, escama) de 16 exemplares procedentes de 13 localidades, além de 4 indivíduos, cujas sequências foram obtidas do GenBank. O DNA das amostras foi submetido à reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando um marcador de origem mitocondrial (citocromo-b – CYTB). Os resultados apontam para a provável ocorrência de diversidade críptica em Boa, uma vez que foi recuperado um clado com exemplares distribuídos restritamente na região da Mata Atlântica. Com base nisso, é necessária uma revisão taxonômica desse grupo para que novos planos urgentes e estratégicos sejam elaborados visando à preservação e conservação da fauna e flora locais.

The molecular investigations on the subgenus Artemisia Less. of the genus Artemisia L. (Asteraceae) in Turkey / Investigações moleculares sobre o subgênero Artemisia Less. do gênero Artemisia L. (Asteraceae) na Turquia

The genus Artemisia L. of the family Asteraceae is systematically very complex. The aim of this study was to evaluate taxonomic positions of taxa of the subgenus Artemisia belonging to the genus Artemisia in Turkey using some molecular techniques. In this molecular study, 44 individuals belong to 14 species of the subgenus Artemisia were examined. Analyses were performed on the combined dataset using maximum parsimony, maximum likelihood and Bayesian inference and Molecular parameters obtained from co-evaluations of sequences of the psbA-trnH, ITS and ETS regions of examined individuals were used in the phylogenetic tree drawing. According to the results of this study, two molecular groups have been formed based on the DNA sequence similarity of the species, but there are no obvious morphological characters corresponding to two molecular groups. There is no also agreement between the two molecular groups and the two morphological groups formed according to the hairiness condition of the receptacle of species. Due to the lack of molecular significance of their receptacles with or without hair, dividing of the subgenus Artemisia species into new subgenera or sections was not considered appropriate. Likewise, it has been found that with or without hair on the corolla lobes of the central hermaphrodite disc flowers have no molecular significance. It was found that there were no gene flow and hybridization between the 14 species of the subgenus Artemisia and these 14 species were found completed their speciation. This study is important as it is the first molecular based study relating with belong to subgenus Artemisia species growing naturally in Turkey. In addition, new haplotypes related to the populations of Turkey belonging to the subgenus Artemisia taxa were reported by us for the first time and added to the GenBank database.

O gênero Artemisia L. da família Asteraceae é sistematicamente muito complexo. O objetivo deste estudo foi avaliar as posições taxonômicas de táxons do subgênero Artemisia pertencentes ao gênero Artemisia na Turquia usando algumas técnicas moleculares. Neste estudo molecular, 44 indivíduos pertencentes a 14 espécies do subgênero Artemisia foram examinados. As análises foram realizadas no conjunto de dados combinado usando máxima parcimônia, máxima verossimilhança e inferência bayesiana e parâmetros moleculares obtidos a partir de coavaliações de sequências das regiões psbA-trnH, ITS e ETS de indivíduos examinados foram usados no desenho da árvore filogenética. De acordo com os resultados deste estudo, dois grupos moleculares foram formados com base na similaridade da sequência de DNA das espécies, mas não há caracteres morfológicos óbvios correspondentes a dois grupos moleculares. Também não há concordância entre os dois grupos moleculares e os dois grupos morfológicos formados de acordo com a condição de pilosidade do receptáculo da espécie. Devido à falta de significado molecular de seus receptáculos com ou sem cabelo, a divisão das espécies do subgênero Artemisia em novos subgêneros ou seções não foi considerada apropriada. Da mesma forma, verificou-se que com ou sem cabelo nos lobos da corola das flores do disco hermafrodita central não tem significado molecular. Constatou-se que não houve fluxo gênico e hibridização entre as 14 espécies do subgênero Artemisia e essas 14 espécies concluíram sua especiação. Este estudo é importante porque é o primeiro estudo de base molecular relacionado com espécies pertencentes ao subgênero Artemisia crescendo naturalmente na Turquia. Além disso, novos haplótipos relacionados às populações da Turquia pertencentes ao subgênero Artemisia taxa foram relatados por nós pela primeira vez e adicionados ao banco de dados do GenBank.

The molecular investigations on the subgenus Artemisia Less. of the genus Artemisia L. (Asteraceae) in Turkey

Abstract The genus Artemisia L. of the family Asteraceae is systematically very complex. The aim of this study was to evaluate taxonomic positions of taxa of the subgenus Artemisia belonging to the genus Artemisia in Turkey using some molecular techniques. In this molecular study, 44 individuals belong to 14 species of the subgenus Artemisia were examined. Analyses were performed on the combined dataset using maximum parsimony, maximum likelihood and Bayesian inference and Molecular parameters obtained from co-evaluations of sequences of the psbA-trnH, ITS and ETS regions of examined individuals were used in the phylogenetic tree drawing. According to the results of this study, two molecular groups have been formed based on the DNA sequence similarity of the species, but there are no obvious morphological characters corresponding to two molecular groups. There is no also agreement between the two molecular groups and the two morphological groups formed according to the hairiness condition of the receptacle of species. Due to the lack of molecular significance of their receptacles with or without hair, dividing of the subgenus Artemisia species into new subgenera or sections was not considered appropriate. Likewise, it has been found that with or without hair on the corolla lobes of the central hermaphrodite disc flowers have no molecular significance. It was found that there were no gene flow and hybridization between the 14 species of the subgenus Artemisia and these 14 species were found completed their speciation. This study is important as it is the first molecular based study relating with belong to subgenus Artemisia species growing naturally in Turkey. In addition, new haplotypes related to the populations of Turkey belonging to the subgenus Artemisia taxa were reported by us for the first time and added to the GenBank database.

Resumo O gênero Artemisia L. da família Asteraceae é sistematicamente muito complexo. O objetivo deste estudo foi avaliar as posições taxonômicas de táxons do subgênero Artemisia pertencentes ao gênero Artemisia na Turquia usando algumas técnicas moleculares. Neste estudo molecular, 44 indivíduos pertencentes a 14 espécies do subgênero Artemisia foram examinados. As análises foram realizadas no conjunto de dados combinado usando máxima parcimônia, máxima verossimilhança e inferência bayesiana e parâmetros moleculares obtidos a partir de coavaliações de sequências das regiões psbA-trnH, ITS e ETS de indivíduos examinados foram usados no desenho da árvore filogenética. De acordo com os resultados deste estudo, dois grupos moleculares foram formados com base na similaridade da sequência de DNA das espécies, mas não há caracteres morfológicos óbvios correspondentes a dois grupos moleculares. Também não há concordância entre os dois grupos moleculares e os dois grupos morfológicos formados de acordo com a condição de pilosidade do receptáculo da espécie. Devido à falta de significado molecular de seus receptáculos com ou sem cabelo, a divisão das espécies do subgênero Artemisia em novos subgêneros ou seções não foi considerada apropriada. Da mesma forma, verificou-se que com ou sem cabelo nos lobos da corola das flores do disco hermafrodita central não tem significado molecular. Constatou-se que não houve fluxo gênico e hibridização entre as 14 espécies do subgênero Artemisia e essas 14 espécies concluíram sua especiação. Este estudo é importante porque é o primeiro estudo de base molecular relacionado com espécies pertencentes ao subgênero Artemisia crescendo naturalmente na Turquia. Além disso, novos haplótipos relacionados às populações da Turquia pertencentes ao subgênero Artemisia taxa foram relatados por nós pela primeira vez e adicionados ao banco de dados do GenBank.

Seasonal droughts during the Miocene drove the evolution of Capparaceae towards Neotropical seasonally dry forests / Las sequías estacionales del Mioceno impulsaron la evolución de Capparaceae hacia los bosques neotropicales estacionalmente secos

Abstract Introduction: Neotropical seasonally dry forest (NSDF) climatic constraints increased endemism, and phylogenetic niche conservatism in species that are restricted to this biome. NSDF have a large number of endemic Capparaceae taxa, but it is unknown if phylogenetic niche conservatism has played a role in this pattern. Objective: We carried out an evolutionary analysis of the climatic niche of neotropical species of Capparaceae to identify whether the climatic constraints of NSDF have played a major role throughout the family's evolutionary history. Methods: Using three chloroplastic (ndhF, matK, rbcL) and one ribosomal (rsp3) DNA sequences, we proposed a date phylogeny to reconstruct the evolutionary climatic niche dynamics of 24 Neotropical species of Capparaceae. We tested the relationship between niche dissimilarity and phylogenetic distance between species using the Mantel test. Likewise, we used a set of phylogenetic comparative methods (PGLS) on the phylogeny of Capparaceae to reconstruct the main evolutionary historic events in their niche. Results: Capparaceae originated in humid regions and subsequently, convergent evolution occurred towards humid and dry forest during the aridification phases of the Middle Miocene (16-11 Mya). However, adaptation towards drought stress was reflected only during the precipitation of the coldest quarter, where we found phylogenetic signal (Pagel λ) for gradual evolution and, therefore, evidence of phylogenetic niche conservatism. We found convergent species-specific adaptations to both drought stress and rainfall during the Miocene, suggesting a non-phylogenetic structure in most climatic variables. Conclusions: Our study shows how the Miocene climate may have influenced the Capparaceae speciation toward driest environments. Further, highlights the complexity of climatic niche dynamics in this family, and therefore more detailed analyses are necessary in order to better understand the NSDF climatic constrictions affected the evolution of Capparaceae.

Resumen Introducción: Las limitaciones climáticas del bosque neotropical estacionalmente seco (NSDF) produjeron endemismo y conservadurismo filogenético del nicho en especies restringidas a este bosque. En las Caparáceas neotropicales se ha encontrado endemismo en los NSDF, pero se desconoce si el conservadurismo de nicho filogenético ha influido en su evolución. Objetivos: Se llevó a cabo un análisis evolutivo del nicho climático de las especies neotropicales de Capparaceae para evaluar si las limitaciones climáticas del bosque neotropical estacionalmente seco (NSDF) han jugado un papel importante a lo largo de la historia evolutiva de la familia. Métodos: Usando tres secuencias de ADN cloroplastico (ndhF, matK, rbcL) y una ribosomal (rsp3) se propuso una filogenia datada para reconstruir la dinámica evolutiva del nicho climático de 24 especies Neotropicales de Capparaceae. Utilizando la prueba de Mantel, se realizaron análisis para establecer si hay diferencia de nicho y la distancia filogenética entre especies. Asimismo, se emplearon un conjunto de métodos comparativos filogenéticos sobre la filogenia de la familia para reconstruir los principales eventos históricos evolutivos en su nicho. Resultados: Capparaceae se originó en regiones húmedas y posteriormente se dio una evolución convergente hacia bosque húmedo y seco durante las fases de aridificación del Mioceno Medio (16-11 Ma). Sin embargo, la adaptación al estrés por sequía se reflejó solo en la precipitación del cuarto más frío del año, donde se evidencio señal filogenética, evolución gradual y, por lo tanto, evidencia de conservadurismo de nicho filogenético. También se hallaron especies con adaptaciones convergentes específicas tanto al estrés por sequía como a las lluvias durante el Mioceno, sugiriendo la carencia de estructura filogenética en la mayoría de las variables climáticas. Conclusiones: Este estudio muestra cómo el clima del Mioceno pudo haber influenciado la especiación de Capparaceae hacia ambientes mas secos. Además, la compleja dinámica del nicho climático en esta familia y, por lo tanto, la necesidad de realizar análisis más detallados para comprender mejor como las constricciones climáticas del NSDF afectaron la evolución de Capparaceae.

Filogenia y resistencia de cepas de Escherichia coli productoras de betalactamasas de espectro extendido a los antibióticos en pacientes con cáncer hospitalizados en Perú / Phylogeny and antimicrobial resistance of extended-spectrum beta-lactamase- producing Escherichia coli from hospitalized oncology patients in Perú

Introducción. Las infecciones asociadas con la atención en salud constituyen un problema de salud pública porque aumentan la morbimortalidad de los pacientes, sobre todo de aquellos con factores de riesgo, como la inmunosupresión debida a enfermedades oncológicas. Es importante conocer la diversidad genética de los principales microorganimos causantes de infecciones hospitalarias mediante la vigilancia epidemiológica tradicional y la epidemiología molecular, para hacer un mejor seguimiento y detectar brotes tempranamente. Objetivo. Determinar el grupo filogenético y la resistencia a antibióticos de las cepas de Escherichia coli aisladas de pacientes con cáncer hospitalizados. Materiales y métodos. Se hizo un estudio de tipo transversal que incluyó 67 cepas de Escherichia coli productoras de betalactamasas de espectro extendido (BLEE). Se determinó el grupo filogenético, el perfil de resistencia a los antibióticos, los genes de resistencia a betalactámicos, el tipo de las muestras y los servicios de hospitalización de donde fueron recuperadas. Resultados. El grupo filogenético más frecuente fue el B2 (36 %). El 57 % de las cepas B2 fueron aisladas de muestras de orina y el 33 % provenía del servicio de urología. La resistencia a ciprofloxacino y gentamicina fue de 91 y 53 %, respectivamente, y el 79 % de las cepas tenía el gen blaCTX-M. Se encontró una relación significativa (p<0,05) entre los grupos filogenéticos y la resistencia a ciprofloxacina, así como a la edad del paciente. Conclusión. El filogrupo de E. coli predominante fue el B2. Se evidenció una gran resistencia a ciprofloxacina y gentamicina, una proporción elevada de cepas BLEE con el blaCTX-M, y una relación entre el grupo filogenético y la resistencia a ciprofloxacino.

Introduction: Healthcare-associated infections are a public health problem due to the increased morbimortality of patients, especially those with risk factors such as immunosuppression due to oncological diseases. It is essential to determine the genetic diversity of the main microorganisms causing healthcare infections by combining traditional epidemiological surveillance and molecular epidemiology for better outbreak follow-up and early detection. Objective: To determine the phylogenetic group and antibiotic resistance of Escherichia coliisolated from hospitalized oncologic patients. Materials and methods: We conducted a cross-sectional study of 67 strains of ESBL-producing Escherichia coli to determine their phylogenetic group and described their antibiotic resistance profile, beta-lactam resistance genes, as well as the type of sample and the hospitalization areas from which they were recovered. Results: The most frequent phylogenetic group was B2 (36%); 57% of B2 strains were isolated from urine and 33% came from the urology department. Resistance to ciprofloxacin and gentamicin was 92% and 53%, respectively, and 79% of the strains had the blaCTX-Mgene. A significant association (p<0.05) was found between the phylogenetic groups, ciprofloxacin resistance, and the age of the patients. Conclusion: The predominant E. coli phylogroup was B2. We evidenced high resistance to ciprofloxacin and gentamicin, a high proportion of ESBL strains with the blaCTX-M gene, and a significant association between the phylogenetic group and the resistance to ciprofloxacin.

Monkeypox virus genome sequence from an imported human case in Colombia / Secuencia genómica del virus de la viruela símica de un caso importado en Colombia

Introduction: Monkeypox virus (MPXV) is an enveloped double-stranded DNA virus with a genome of approximately 197.209 bp. The current classification divides MPXV into three clades: Clade I (Central African or Congo Basin clade) and clades IIa and IIb (West African clades). Objective: To report the complete genome and phylogenetic analysis of a human monkeypox case detected in Colombia. Materials and methods: Exudate from vesicular lesions was obtained from a male patient with recent travel history to Spain. A direct genomic approach was implemented in which total DNA from the sample was purified through a column-based method, followed by sequencing on the Nanopore GridION. Reads were aligned against the MPXV reference genome using minimap2 v.2.24 and phylogenetic inference was performed using maximum likelihood estimation. Results: A total of 11.951 reads mapped directly to a reference genome with 96.8% of coverage (190.898 bp). Conclusion: Phylogenetic analysis of the MPXV circulating in Colombia demonstrated its close relationship to clade IIb responsible for the multi-country outbreak in 2022.

Introducción. El virus de la viruela del mono (MPXV) está compuesto por un genoma de ADN bicatenario, aproximadamente, de 197.209 pb. La clasificación actual agrupa el MPXV en tres clados: clado I (de la cuenca del Congo en África central), y clados IIa y IIb (de África occidental). Objetivo. Reportar el genoma completo y el análisis filogenético de un caso humano de viruela símica detectado en Colombia. Materiales y métodos. Se obtuvo exudado de lesiones vesiculares de un paciente varón con el antecedente de un viaje reciente a España. Se implementó un enfoque directo, en el cual se purificó el ADN total de la muestra mediante un método basado en columnas, seguido de la secuenciación directa en la plataforma Nanopore GridION. Las lecturas se alinearon con el genoma de referencia del MPXV, utilizando minimap2, v.2.24, y la inferencia filogenética fue realizada mediante la estimación por máxima verosimilitud. Resultados. Un total de 11.951 lecturas se alinearon directamente con el genoma de referencia con una cobertura del 96,8 % (190.898 pb). Conclusión. El análisis filogenético del MPXV circulante en Colombia demostró su estrecha relación con el clado de África occidental (clado IIb) responsable del brote en múltiples países en el 2022.

Phylogeny-based conservation priorities for Australian freshwater fishes.

Conservation scientists are increasingly interested in the question of how extinction prunes the tree of life. This question is particularly important for Australian freshwater fishes because there is a broad mix of ∼300 old and young species, many of which are severely threatened. We used a complete species-level phylogeny of Australian freshwater fishes to examine phylogenetic nonrandomness of extinction risk. We computed the potential loss of phylogenetic diversity by simulating extinction across the tree under a pattern weighted based on International Union for Conservation of Nature extinction risk category and compared this loss to projected diversity loss under a random null model of extinction. Finally, we calculated EDGE (evolutionary distinctiveness, global endangerment) scores for 251 freshwater and 60 brackish species and compiled a list of high-priority species for conservation actions based on their extinction risk and evolutionary uniqueness. Extinction risk was not random and was clustered in both diversity cradles (recently diversifying, species-rich clades, such as Galaxiidae and Percichthyidae) and museums (older, species-poor groups, such as freshwater chondrichthyans). Clustered extinction made little difference to the average expected loss of phylogenetic diversity. However, the upper bound of loss was higher under a selective model of extinction, particularly when the counts of species lost were low. Thus, the loss of highly threatened species would diminish the tree of life more than a null model of randomly distributed extinction.  High priority species included both widely recognized and charismatic ones, such as the Queensland lungfish (Neoceratodus forsteri), river sharks, and freshwater sawfishes, and lesser-known species that receive less public attention, including the salamanderfish (Lepidogalaxias salamandroides), cave gudgeons, and many galaxiids, rainbowfishes, and pygmy perches.

Prioridades de Conservación Basadas en la Filogenia para Peces de Agua Dulce de Australia Resumen Los científicos de la conservación cada vez están más interesados en el tema de cómo la extinción poda al árbol de la vida. Esta cuestión es particularmente importante para los peces de agua dulce de Australia ya que existe una mezcla amplia de ∼300 especies antiguas y recientes, muchas de las cuales se encuentran seriamente amenazadas. Usamos una filogenia completa a nivel de especie de los peces de agua dulce de Australia para examinar la no aleatoriedad filogenética del riesgo de extinción. Computamos la pérdida potencial de la diversidad filogenética mediante la simulación de la extinción en todo el árbol bajo un patrón ponderado con base en la categoría de riesgo de extinción de la Unión Internacional para la Conservación de la Naturaleza y la comparamos con la pérdida proyectada de diversidad bajo un modelo aleatorio nulo de la extinción. Por último, calculamos los puntajes EDGE (peculiaridad evolutiva, riesgo global) para 251 especies de agua dulce y 60 especies de agua salobre y recopilamos una lista de especies de alta prioridad para las acciones de conservación basada en su riesgo de extinción y su singularidad evolutiva. El riesgo de extinción no fue aleatorio y estuvo agrupado tanto en cunas de diversidad (clados ricos en especies con diversificación reciente, como Galaxiidae y Percichthyidae) como en museos (grupos más viejos con pocas especies, como los condrictios de agua dulce). La extinción agrupada no trajo grandes diferencias para la pérdida promedio esperada de la diversidad filogenética. Sin embargo, el límite superior de la pérdida fue más alto bajo un modelo selectivo de extinción, particularmente cuando los conteos de especies perdidas fueron bajos. Por lo tanto, la pérdida de especies en grave peligro de extinción disminuiría el árbol de la vida más que un modelo nulo de extinción distribuida aleatoriamente. Las especies de mayor prioridad incluyeron tanto a las más conocidas y carismáticas, como el pez pulmonado de Queensland (Neoceratodus forsteri), los tiburones de río y los peces sierra de agua dulce, como a las especies menos conocidas que reciben menos atención del público, incluyendo al pez salamandra (Lepidogalaxias salamandroides), los gobios de las cuevas y a muchos galaxiidos, peces arcoiris y percas pigmeas.

An investigation on the chloroplast and nuclear genomes of taxa belong to the subgenus Dracunculus (Bess.) Rydb. of Artemisia L. (Asteraceae) in Turkey / Uma investigação sobre o cloroplasto e os genomas nucleares de táxons pertencentes ao subgênero Dracunculus (Bess.) Rydb. de Artemisia L. (Asteraceae) na Turquia

Artemisia is one of the biggest genera in the family Asteraceae, with around 500-600 taxa at specific and subspecific levels and organised in 5 subgenera. Due to the high number of taxa, a lot taxonomists are trying to solve the problem of its classification and phylogeny but its natural classification still hasn't been achieved. In this research, 60 individuals belonging to 4 taxa of the subgenus Dracunculus of Artemisia L. in Turkey were examined. For all the examined individuals from both the same and different populations belonging to the taxa of the subgenus Dracunculus, the sequences of the regions both psbA-trnH of chloroplast DNA and ITS of nuclear DNA were determined. Also, the gene regions obtained were recorded in the NCBI GenBank database and an accession number was taken. It was found that there was no gene flow and hybridization between the four studied taxa of the subgenus Dracunculus, and these 4 taxa also completed their speciation. According to the results of this molecular study, A. campestris var. campestris, A. campestris var. marschalliana and A. campestris var. araratica were proposed to be raised from the variety level to the species level. This research is important as it is the first molecular based study relating with the subgenus Dracunculus growing in Turkey.

Artemisia é um dos maiores gêneros da família Asteraceae, com cerca de 500 a 600 táxons em níveis específicos e subespecíficos e organizados em cinco subgêneros. Em razão do grande número de táxons, muitos taxonomistas estão tentando resolver o problema de sua classificação e filogenia, mas sua classificação natural ainda não foi alcançada. Nesta pesquisa, 60 indivíduos pertencentes a quatro táxons do subgênero Dracunculus de Artemisia L. na Turquia foram examinados. Para todos os indivíduos examinados de populações iguais e diferentes pertencentes aos táxons do subgênero Dracunculus, foram determinadas as sequências das regiões psbA-trnH do DNA do cloroplasto e ITS do DNA nuclear. Além disso, as regiões gênicas obtidas foram registradas no banco de dados do NCBI GenBank e um número de acesso foi obtido. Foi constatado que não houve fluxo gênico nem hibridização entre os quatro táxons estudados do subgênero Dracunculus, os quais também completaram sua especiação. De acordo com os resultados deste estudo molecular, A. campestris var. campestris, A. campestris var. marschalliana e A. campestris var. araratica foram propostos para ser elevados do nível de variedade para o nível de espécie. Esta pesquisa é importante porque é o primeiro estudo de base molecular relacionado com o subgênero Dracunculus em crescimento na Turquia.

Patterns of diversification and phylogenetic structure in the dorsolateral head musculature of Neotropical electric eels (Ostariophysi: Gymnotiformes), with a myological synonymy

The present study offers a broad comparative analysis of the dorsolateral head musculature in the Gymnotiformes, with detailed descriptions and illustrations of the dorsolateral head muscles of 83 species representing combined all valid genera. Results permit a detailed assessment of primary homologies and taxonomically-relevant variation across the order. This provides the basis for a myological synonymy, which organizes 33 previously proposed names for 15 recognized muscles. Morphological variation derived from dorsolateral head musculature was coded into 56 characters. When analyzed in isolation, that set of characters results in Gymnotidae as the sister group of remaining gymnotiforms, and all other currently recognized families as monophyletic groups. In a second analysis, myological characters were concatenated with other previously proposed characters into a phenotypic matrix. Results of that analysis reveal new myological synapomorphies for nearly all taxonomic categories within Gymnotiformes. A Partitioned Bremer Support (PBS) was used to asses the significance of comparative myology in elucidating phylogenetic relationships. PBS values show strongly non-uniform distributions on the tree, with positive scores skewed towards more inclusive taxa, and negative PBS values concentrated on less inclusive clades. Our results provide background for future studies on biomechanical constraints evolved in the early stages of gymnotiform evolution.(AU)

O presente estudo fornece uma ampla análise comparativa da musculatura dorsolateral da cabeça dos Gymnotiformes, com descrições detalhadas e ilustrações dos músculos dorsolaterais da cabeça de 83 espécies representando quase todos os gêneros válidos. Resultados permitem uma avaliação das homologias primárias e da variação taxonomicamente relevante na ordem. Isto fornece a base para uma sinonímia da nomenclatura miológica que organiza 33 nomes previamente propostos para os 15 músculos reconhecidos. As variações morfológicas da musculatura dorsolateral da cabeça foram codificadas em 56 caracteres. Este conjunto de dados foi inicialmente analisado isoladamente, resultando em Gymnotidae como grupo-irmão dos demais Gymnotiformes; e todas as famílias como grupos monofiléticos. Numa segunda análise, os caracteres musculares foram concatenados com uma matriz fenotípica previamente proposta compondo uma ampla matriz morfológica combinada. Os resultados desta análise revelaram novas sinapomorfias miológicas para todas as categorias taxonômicas em Gymnotiformes. O Suporte de Bremer Particionado (SBP) foi implementado para acessar a influência da miologia em elucidar os relacionamentos filogenéticos. Os valores de SBP exibem uma distribuição não uniforme na árvore, com indicadores positivos para agrupamentos mais inclusivos e valores negativos de SBP em clados menos inclusivos. Nossos resultados fornecem subsídios para investigações futuras sobre as restrições biomecânicas envolvidas nos estágios inicias da evolução dos Gymnotiformes.(AU)

Molecular classification and comparative phylogeographic study of insectivorous bat species (Pipisitrellus coromandra) from Punjab, Pakistan / Classificação molecular e estudo filogeográfico comparativo de espécies de morcegos insetívoros (Pipistrellus coromandra) de Punjab, Paquistão

Molecular based identification of bat fauna in Pakistan has been relatively less explored. The current study was therefore planned to report for the first time the molecular classification of insectivorous bats (Pipistrellus coromandra) based on mitochondrion gene (COI) from Punjab, Pakistan. Specimens were collected from five different locations followed by DNA extraction with subsequent gene amplification and sequencing. All samples in the study had shown close identity matches with species (Pipistrellus coromandra) from India and (Pipistrellus tenuis) from Vietnam with percentage identity score of 96.11 and 95.58 respectively except one sequence which only revealed 86.78% identity match on Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) and could only be assigned to genus level Pipistrellus sp. The results indicated negligible intra-population genetic distance among collected samples whereas the comparison with species from other countries had shown high intraspecific (P. coromandra) and interspecific (P. tenuis) mean genetic distances. The current study hence successfully proved the efficiency of COI gene as a molecular marker for species identification and in analyzing the patterns of genetic variation with species from other countries.

A identificação com base molecular da fauna de morcegos no Paquistão tem sido relativamente menos explorada. Portanto, o estudo atual foi planejado para relatar pela primeira vez a classificação molecular de morcegos insetívoros (Pipistrellus coromandra) com base no gene da mitocôndria (COI) de Punjab, Paquistão. As amostras foram coletadas em cinco locais diferentes, seguidas pela extração de DNA com subsequente amplificação e sequenciamento do gene. Todas as amostras no estudo mostraram coincidências de identidade próximas com espécies (Pipistrellus coromandra) da Índia e (Pipistrellus tenuis) do Vietnã, com pontuação de identidade percentual de 96,11 e 95,58, respectivamente, exceto uma sequência que revelou apenas 86,78% de correspondência de identidade na Ferramenta de Pesquisa de Alinhamento Local Básico (BLAST), a qual só poderia ser atribuída ao nível de gênero Pipistrellus sp. Os resultados indicaram distância genética intrapopulacional desprezível entre as amostras coletadas, enquanto a comparação com espécies de outros países mostrou altas distâncias genéticas intraespecíficas (P. coromandra) e interespecíficas (P. tenuis) médias. O presente estudo, portanto, comprovou com sucesso a eficiência do gene COI como marcador molecular para identificação de espécies e análise dos padrões de variação genética com espécies de outros países.

Interações sexuais entre indivíduos do mesmo sexo: um olhar evolucionista / Same-sex sexual interactions: an evolutionary perspective / Interactions sexuelles entre personnes du même sexe: une perspective évolutionniste / Interacciones sexuales entre individuos del mismo sexo: una visión evolucionista

Resumo Sob uma perspectiva evolutiva, as interações sexuais entre indivíduos do mesmo sexo foram por muito tempo consideradas um grande paradoxo. Isso por terem persistido no decorrer das gerações apesar de supostamente não oferecerem benefícios reprodutivos diretos, reduzindo, aparentemente, a aptidão individual. Apesar disso, são comuns em muitas espécies animais. Neste artigo, revisaremos algumas das hipóteses funcionais que tentam resolver esse quebra-cabeça evolutivo. Algumas dessas hipóteses consideram essas interações adaptativas, o que significa que trariam benefícios para os indivíduos. Outras as consideram neutras, derivadas de características realmente vantajosas. Por fim, existem as que consideram essas interações como não-adaptativas e potencialmente prejudiciais aos indivíduos. Ao final, abordaremos uma hipótese revolucionária que, de forma inédita, questiona se as interações sexuais envolvendo exclusivamente indivíduos de sexos diferentes seriam realmente o estado basal do comportamento sexual.

Abstract From an evolutionary point of view, same-sex sexual interactions have long been considered a major paradox. This is because they have persisted throughout generations despite, presumably, not offering direct reproductive benefits and, apparently, reducing individual fitness. Nonetheless, same-sex sexual interactions are common in many animal species. This paper reviews some functional hypotheses that seek to solve this evolutionary puzzle: some consider it adaptative, meaning that these behaviors would bring benefits to individuals; others see it as a neutral by-product of other advantageous characteristics. A third branch understand same-sex sexual interactions to be non-adaptative and potentially deleterious to individuals. Finally, this paper discusses a revolutionary hypothesis that, unprecedently, questions whether sexual interactions involving exclusively individuals of the opposite sex are in fact the basal state of sexual behavior.

Résumé Du point de vue de l'évolution, les interactions sexuelles entre personnes du même sexe ont longtemps été considérées comme un grand paradoxe majeur. En effet, elles ont persisté au fil des générations bien qu'elles n'offrent vraisemblablement pas d'avantages reproductifs directs et qu'elles réduisent apparemment la valeur adaptative individuelle. Néanmoins, sont courantes chez de nombreuses espèces animales. Cet article passe en revue certaines hypothèses fonctionnelles qui cherchent à résoudre cette énigme évolutive : certaines considèrent les interactions comme adaptatives, ce qui signifie que ces comportements apporteraient des avantages aux individus ; d'autres voient les comme un sous-produit neutre d'autres caractéristiques avantageuses. Une troisième branche les comprend comme étant non-adaptatives et potentiellement délétères pour les individus. Enfin, on discute d'une hypothèse révolutionnaire qui, sans précédent, remet en question le fait que les interactions sexuelles impliquant exclusivement des individus du sexe opposé serait l'état ancestral du comportement sexuel.

Resumen Desde una perspectiva evolutiva, las interacciones sexuales entre individuos del mismo sexo han sido consideradas por mucho tiempo como una enorme paradoja. Esto es debido a que han persistido generación tras generación a pesar de, supuestamente, no ofrecer beneficios reproductivos directos, reduciendo, aparentemente, la aptitud individual. Sin embargo, son comunes en muchas especies de animales. En este artículo repasaremos algunas de las hipótesis funcionales que intentan resolver este rompecabezas evolutivo. Algunas de estas hipótesis consideran que estas interacciones son adaptativas, lo que trae benefícios a los individuos. Otras hipótesis las consideran neutras, derivadas de características realmente ventajosas. Mientras que otras consideran estas interacciones como no adaptativas y potencialmente perjudiciales para los individuos. Por último, expondremos una hipótesis revolucionaria que, de manera inédita, cuestiona si las interacciones sexuales que involucran exclusivamente a individuos de diferentes sexos son realmente el estado basal del comportamiento sexual.

Revisão da classificação de bactérias e investigação de genes de interesse médico por meio de análise genômica (in silico) e ferramentas de bioinformática

Bioinformatics has generated a great impact in the scientific field due to its diverse applications, one of its highlights being the study of genomes through tools that make it possible to carry out sequence alignment, identification of protein families profile, genome annotation and the investigation of presence/absence of resistance and virulence genes based on different databases. A resource that has recently gained prominence in the classification of microorganisms is called ANI (Average Nucleotide Identity), which seeks, through the average nucleotide similarity between genomes, to demarcate boundaries between species. Another relevant resource is the investigation of microorganisms with potential multi-resistance. We used both of these resources to investigate a significative number of isolates of the genus Neisseria and Vibrio, which, in addition to having gone through recent phylogenetic reclassifications, present possible multiresistant species. We sought to identify possible classification inconsistencies of species from the genus Neisseria and Vibrio through ANI, proposing reclassifications when applicable. Another objective was to analyze the presence / absence of resistance and virulence genes through bioinformatics software. Among the investigated species N. sicca LPB0402 and N. perflava LPB0400 need to undergo a reclassification, due to having presented ANI of 99.99%, which define them as the same species. Concerning the genus Vibrio, we suggest with low doubt, that V. lentus 5F79 and V. tasmaniensis 5F79 are the same species, since they present ANI of 99.97%, whereas V. lentus 10N6145B10 with ANI of 95.62% and 95.64% respectively, when compared to these two isolates cited above, should also be included in this same species. As for resistance genes N. lactamica, N. gonorrhoeae, N. meningitidis and especially N. brasiliensis N17716, V. hepatarius DSM19134 and V. cholerae 1Mo have a potential profile of multiresistance; V. mimicus 2011V1073 stood out in terms of virulence. We can conclude that the analysis of the genome of bacterial isolates allowed us to find classification inconsistencies and to generate proposals for reclassification, as well as allowed us to show that isolates not considered of medical interest actually have a large number of genes for vituence and antimicrobial resistance, reason why they should have their vigilance increased.

A bioinformática tem gerado grande impacto no campo científico devido às suas diversas aplicações, sendo um de seus destaques o estudo de genomas por meio de ferramentas que possibilitam realizar alinhamento de sequências, identificação do perfil de famílias de proteínas, anotação de genomas e a investigação da presença/ausência de genes de resistência e virulência baseados em diferentes conjuntos de dados. Um recurso que ganhou destaque recentemente na reclassificação de microrganismos foi a análise por ANI (Average Nucleotide Identity), que busca por meio da média de similaridade nucleotídica entre os genomas, demarcar limites entre espécies. Um outro recurso relevante é a investigação de microrganismos com potencial multirresistência. Utilizando essas duas ferramentas, avaliamos um grande número de isolados dos gêneros Neisseria e Vibrio, que além de terem passado por recentes reclassificações filogenéticas, apresentam potenciais espécies multiresistentes. Buscamos identificar possíveis inconsistências de classificação de espécies dos gêneros Neisseria e Vibrio por meio de ANI, propondo reclassificações quando aplicáveis. Outro objetivo foi analisar a presença/ausência de genes de resistência e virulência por meio de softwares de bioinformática. Dentre as espécies investigadas N. sicca LPB0402 e N. perflava LPB0400 precisam passar por uma reclassificação, devido terem apresentado ANI de 99,99%, o que as define como a mesma espécie. Quanto ao gênero Vibrio sugerimos, com pouca margem de dúvida, que V. lentus 5F79 e V. tasmaniensis 5F79 são a mesma espécie, por apresentarem ANI de 99,97%, podendo V. lentus 10N6145B10 com ANI de 95,62% e 95,64% respectivamente quando comparado comos dois isolados citadas acima, ser incluso nesta mesma espécie. Quanto aos genes de resistência N. lactamica, N. gonorrhoeae, N. meningitidis e principalmente N. brasiliensis N17716, V. hepatarius DSM19134 e V. cholerae 1Mo apresentaram um perfil potencial de multirresistência; V. mimicus 2011V1073 se destacou no quesito virulência Podemos concluir que a análise do genoma de isolados bacterianos nos permitiu encontrar inconsistencias de classificação e gerar propostas de reclassificação, assim como permitiu detectar que isolados não considerados como de interesse médico possuem, na verdade, grande número de genes de vitulência e resistencia antimicromiana, motivo pelo qual devem ter sua vigilância aumentada.

Estudo comparativo da microbiota fúngica oral em profissionais da área da saúde, pacientes internados em Unidade de Terapia Intensiva e indivíduos isentos de contato hospitalar / Comparative study of oral fungal microbiota in healthcare professionals, patients interned in intensive care unit and individuals without hospital contact

O conhecimento sobre a microflora fúngica oral em pacientes com COVID-19 ainda precisam ser avaliadas. Este estudo tem como objetivo mapear e comparar as principais espécies de fungos presentes na cavidade oral (com foco nas espécies de Candida) de pacientes com COVID-19 em unidades de terapia intensiva e seus profissionais de saúde. A coleta oral foi realizada com swabs em cento e vinte e oito indivíduos (incluindo um grupo controle). As amostras foram cultivadas em CHROMagar (CROMOagar, Pinhais, PR. Br) e incubadas a 37°C por 7 dias. Seguindo as instruções do fabricante foi realizada uma identificação inicial das espécies de Candida isoladas. A identificação final das espécies foi realizada utilizando DNA genômico extraído dos fungos isolados e PCR com primers universais 18S SSURNA e sequenciamento genético. A dessorção a laser assistida por matriz/tempo de voo de ionização (MALDI-TOF) também foi implementada juntamente com os procedimentos moleculares. Oito espécies diferentes de Candida (incluindo espécies de Pichia), Ogataea polymorpha, Saccharomyces cerevisiae e Trichosporum ashii foram identificadas na cavidade oral da população investigada. A análise comparativa, usando dados filogenéticos e MALDI-TOF, das espécies isoladas de Candida, mostrou uma correlação estatística entre as espécies presentes em pacientes e profissionais de saúde, sugerindo transmissão putativa entre os dois grupos. Nossos dados pedem medidas sobre estratégias de biossegurança para controlar possíveis contaminações de superfícies e a transmissão de patógenos que representam riscos à qualidade de vida em ambientes de saúde.

Information regarding oral fungal microflora in patients with COVID-19 has yet to be evaluated. This study aims are to map and compare the main species of fungi present in the oral cavity (with focus on Candida species) of COVID-19 patients in intensive care units and their health providers. The oral collection was carried out with swabs in one hundred twenty-eight individuals (including a control group). The samples were cultured on CHROMagar (CROMOagar, Pinhais, PR. Br) and incubated at 37°C for 7 days. Following the manufacturer's instructions an initial identification of the isolated Candida species was performed. The final identification of the species was carried out using genomic DNA extracted from the isolated fungi and PCR with 18S SSURNA universal primers and genetic sequencing. Matrix-Assisted Laser desorption/Ionization-time of flight (MALDI-TOF) was also implemented along with the molecular procedures. Eight different Candida species (including Pichia species), Ogataea polymorpha, Saccharomyces cerevisiae, and Trichosporum ashii were identified in the oral cavity of the investigated population. Comparative analysis, using phylogenetic and MALDI-TOF data, of the isolated Candida species, showed a statistic correlation between the species present in patients and health care providers, suggesting putative transmission between the two groups. Our data call for measurements on biosecurity strategies to control possible contamination of surfaces and the transmission of pathogens that pose risks to the quality of life in health care environments.

Molecular classification and comparative phylogeographic study of insectivorous bat species (Pipisitrellus coromandra) from Punjab, Pakistan / Classificação molecular e estudo filogeográfico comparativo de espécies de morcegos insetívoros (Pipistrellus coromandra) de Punjab, Paquistão

Molecular based identification of bat fauna in Pakistan has been relatively less explored. The current study was therefore planned to report for the first time the molecular classification of insectivorous bats (Pipistrellus coromandra) based on mitochondrion gene (COI) from Punjab, Pakistan. Specimens were collected from five different locations followed by DNA extraction with subsequent gene amplification and sequencing. All samples in the study had shown close identity matches with species (Pipistrellus coromandra) from India and (Pipistrellus tenuis) from Vietnam with percentage identity score of 96.11 and 95.58 respectively except one sequence which only revealed 86.78% identity match on Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) and could only be assigned to genus level Pipistrellus sp. The results indicated negligible intra-population genetic distance among collected samples whereas the comparison with species from other countries had shown high intraspecific (P. coromandra) and interspecific (P. tenuis) mean genetic distances. The current study hence successfully proved the efficiency of COI gene as a molecular marker for species identification and in analyzing the patterns of genetic variation with species from other countries.

A identificação com base molecular da fauna de morcegos no Paquistão tem sido relativamente menos explorada. Portanto, o estudo atual foi planejado para relatar pela primeira vez a classificação molecular de morcegos insetívoros (Pipistrellus coromandra) com base no gene da mitocôndria (COI) de Punjab, Paquistão. As amostras foram coletadas em cinco locais diferentes, seguidas pela extração de DNA com subsequente amplificação e sequenciamento do gene. Todas as amostras no estudo mostraram coincidências de identidade próximas com espécies (Pipistrellus coromandra) da Índia e (Pipistrellus tenuis) do Vietnã, com pontuação de identidade percentual de 96,11 e 95,58, respectivamente, exceto uma sequência que revelou apenas 86,78% de correspondência de identidade na Ferramenta de Pesquisa de Alinhamento Local Básico (BLAST), a qual só poderia ser atribuída ao nível de gênero Pipistrellus sp. Os resultados indicaram distância genética intrapopulacional desprezível entre as amostras coletadas, enquanto a comparação com espécies de outros países mostrou altas distâncias genéticas intraespecíficas (P. coromandra) e interespecíficas (P. tenuis) médias. O presente estudo, portanto, comprovou com sucesso a eficiência do gene COI como marcador molecular para identificação de espécies e análise dos padrões de variação genética com espécies de outros países.

An investigation on the chloroplast and nuclear genomes of taxa belong to the subgenus Dracunculus (Bess) Rydb. of Artemisia L (Asteraceae) in Turkey / Uma investigação sobre o cloroplasto e os genomas nucleares de táxons pertencentes ao subgênero Dracunculus (Bess) Rydb. de Artemisia L (Asteraceae) na Turquia

Artemisia is one of the biggest genera in the family Asteraceae, with around 500-600 taxa at specific and sub specific levels and organised in 5 subgenera. Due to the high number of taxa, a lot taxonomists are trying to solve the problem of its classification and phylogeny but its natural classification still hasn't been achieved. In this research, 60 individuals belonging to 4 taxa of the subgenus Dracunculus of Artemisia L. in Turkey were examined. For all the examined individuals from both the same and different populations belonging to the taxa of the subgenus Dracunculus, the sequences of the regions both psbA-trnH of chloroplast DNA and ITS of nuclear DNA were determined. Also, the gene regions obtained were recorded in the NCBI GenBank database and an accession number was taken. It was found that there was no gene flow and hybridization between the four studied taxa of the subgenus Dracunculus, and these 4 taxa also completed their speciation. According to the results of this molecular study, A. campestris var. campestris, A. campestris var. marschalliana and A. campestris var. araratica were proposed to be raised from the variety level to the species level. This research is important as it is the first molecular based study relating with the subgenus Dracunculus growing in Turkey.

Artemisia é um dos maiores gêneros da família Asteraceae, com cerca de 500 a 600 táxons em níveis específicos e subespecíficos e organizados em cinco subgêneros. Em razão do grande número de táxons, muitos taxonomistas estão tentando resolver o problema de sua classificação e filogenia, mas sua classificação natural ainda não foi alcançada. Nesta pesquisa, 60 indivíduos pertencentes a quatro táxons do subgênero Dracunculus de Artemisia L. na Turquia foram examinados. Para todos os indivíduos examinados de populações iguais e diferentes pertencentes aos táxons do subgênero Dracunculus, foram determinadas as sequências das regiões psbA-trnH do DNA do cloroplasto e ITS do DNA nuclear. Além disso, as regiões gênicas obtidas foram registradas no banco de dados do NCBI GenBank e um número de acesso foi obtido. Foi constatado que não houve fluxo gênico nem hibridização entre os quatro táxons estudados do subgênero Dracunculus, os quais também completaram sua especiação. De acordo com os resultados deste estudo molecular, A. campestris var. campestris, A. campestris var. marschalliana e A. campestris var. araratica foram propostos para ser elevados do nível de variedade para o nível de espécie. Esta pesquisa é importante porque é o primeiro estudo de base molecular relacionado com o subgênero Dracunculus em crescimento na Turquia.

Molecular classification and comparative phylogeographic study of insectivorous bat species (Pipisitrellus coromandra) from Punjab, Pakistan

Abstract Molecular based identification of bat fauna in Pakistan has been relatively less explored. The current study was therefore planned to report for the first time the molecular classification of insectivorous bats (Pipistrellus coromandra) based on mitochondrion gene (COI) from Punjab, Pakistan. Specimens were collected from five different locations followed by DNA extraction with subsequent gene amplification and sequencing. All samples in the study had shown close identity matches with species (Pipistrellus coromandra) from India and (Pipistrellus tenuis) from Vietnam with percentage identity score of 96.11 and 95.58 respectively except one sequence which only revealed 86.78% identity match on Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) and could only be assigned to genus level Pipistrellus sp. The results indicated negligible intra-population genetic distance among collected samples whereas the comparison with species from other countries had shown high intraspecific (P. coromandra) and interspecific (P. tenuis) mean genetic distances. The current study hence successfully proved the efficiency of COI gene as a molecular marker for species identification and in analyzing the patterns of genetic variation with species from other countries.

Resumo A identificação com base molecular da fauna de morcegos no Paquistão tem sido relativamente menos explorada. Portanto, o estudo atual foi planejado para relatar pela primeira vez a classificação molecular de morcegos insetívoros (Pipistrellus coromandra) com base no gene da mitocôndria (COI) de Punjab, Paquistão. As amostras foram coletadas em cinco locais diferentes, seguidas pela extração de DNA com subsequente amplificação e sequenciamento do gene. Todas as amostras no estudo mostraram coincidências de identidade próximas com espécies (Pipistrellus coromandra) da Índia e (Pipistrellus tenuis) do Vietnã, com pontuação de identidade percentual de 96,11 e 95,58, respectivamente, exceto uma sequência que revelou apenas 86,78% de correspondência de identidade na Ferramenta de Pesquisa de Alinhamento Local Básico (BLAST), a qual só poderia ser atribuída ao nível de gênero Pipistrellus sp. Os resultados indicaram distância genética intrapopulacional desprezível entre as amostras coletadas, enquanto a comparação com espécies de outros países mostrou altas distâncias genéticas intraespecíficas (P. coromandra) e interespecíficas (P. tenuis) médias. O presente estudo, portanto, comprovou com sucesso a eficiência do gene COI como marcador molecular para identificação de espécies e análise dos padrões de variação genética com espécies de outros países.